提速DNA電泳速度

來(lái)自賓夕法尼亞州費(fèi)城杰佛遜醫(yī)學(xué)院(Jefferson Medical College)外科系，以及Kimmel腫瘤中心(Kimmel Cancer Center)的研究人員申請(qǐng)到了一項(xiàng)新**，這項(xiàng)**也許未來(lái)某天會(huì)成為dna分析過(guò)程中的關(guān)鍵技術(shù)，而且這一發(fā)現(xiàn)也可以應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域，比如法醫(yī)鑒定，克隆或者生物恐怖(bioterrorism)。

這一**由約翰霍普金斯醫(yī)學(xué)院助理教授Jonathan Brody博士，以及其同事Scott Kern共同擁有，他們發(fā)明了一種新的技術(shù)，能將DNA分離技術(shù)，即DNA電泳的速度提高5倍，并降低實(shí)驗(yàn)成本。Brody博士表示，“僅僅通過(guò)提高分析的速度，它就能幫助我們每年節(jié)省數(shù)百萬(wàn)美元?！?/p>

凝膠電泳是一大類技術(shù)，被科學(xué)工作者用于分離不同物理性質(zhì)(如大小、形狀、等電點(diǎn)等)的分子。凝膠電泳通常用于分析用途，但也可以作為制備技術(shù)，在采用某些方法(如質(zhì)譜(MS)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、克隆技術(shù)、DNA測(cè)序或者**印跡)檢測(cè)之前部分提純分子。 該技術(shù)操作簡(jiǎn)便快速，可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無(wú)法分離的DNA片段。當(dāng)用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide， EB)染色，在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶，從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外，還可以從電泳后的凝膠中回收特定的DNA條帶，用于以后的克隆技術(shù)操作。

瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣，不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長(zhǎng)度從200bp至近 50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強(qiáng)度和方向恒定的電場(chǎng)下電泳。聚丙烯酰胺分離小片段DNA(5-500bp)效果較好，其分辯力極高，甚至相差1bp的DNA片段就能分開(kāi)。聚丙烯酰胺凝膠電泳很快，可容納相對(duì)大量的DNA，但制備和操作比瓊脂糖凝膠困難。聚丙烯酰胺凝膠采用垂直裝置進(jìn)行電泳。目前，一般實(shí)驗(yàn)室多用瓊脂糖水平平板凝膠電泳裝置進(jìn)行DNA電泳。

瓊脂糖DNA是大多數(shù)分子生物學(xué)技術(shù)都要用到的實(shí)驗(yàn)手段，可謂是一種常規(guī)技術(shù)，其原理主要是電場(chǎng)中在中性pH值下帶負(fù)電荷的DNA向陽(yáng)極遷移，線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對(duì)數(shù)成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難于在凝膠孔隙中蠕行，因而遷移得越慢。