Clontech，曾經(jīng)是華人的驕傲，其開發(fā)的產(chǎn)品曾多次獲得R&D 100大獎(jiǎng)。雖說幾經(jīng)沉浮，但如今TaKaRa旗下的Clontech仍在基因表達(dá)領(lǐng)域默默耕耘，不斷開發(fā)新產(chǎn)品。對于從事基因表達(dá)的研究人員來說，Smart Race、酵母雙雜交系統(tǒng)、慢病毒與腺病毒載體、多色熒光蛋白載體這些產(chǎn)品大家都不會(huì)陌生。近幾年，Clontech也推出了不少優(yōu)良的轉(zhuǎn)染試劑，包括干細(xì)胞專用的轉(zhuǎn)染試劑。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
為了提高轉(zhuǎn)染效率，我們往往會(huì)增加質(zhì)粒dna和轉(zhuǎn)染試劑的量，但不幸的是，大部分轉(zhuǎn)染試劑都會(huì)傷害細(xì)胞。然而，出身名門的Xfect轉(zhuǎn)染試劑卻是與眾不同。當(dāng)時(shí)，麻省理工大學(xué)的科學(xué)家篩選了2300多種候選聚合物，鑒定出轉(zhuǎn)染效果出色、而細(xì)胞毒性極低的聚合物。這就是Xfect的前身。這種新型的可生物降解的納米顆粒在實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染的同時(shí)，也不會(huì)殺死您的細(xì)胞。
Xfect轉(zhuǎn)染試劑適用于大部分細(xì)胞類型。經(jīng)過測試，它在一些常用的細(xì)胞系，如HeLa、HEK-293、CHO-K1和HT1080細(xì)胞中都有著80%以上的轉(zhuǎn)染效率。對于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如Jurkat細(xì)胞，它比競爭產(chǎn)品的轉(zhuǎn)染效率高出40倍。此外，Xfect毒性也較低。以往，由于轉(zhuǎn)染試劑不能耐受血清，轉(zhuǎn)染過程中還得換成無血清培養(yǎng)基，甚是麻煩。Xfect則不受血清的影響，轉(zhuǎn)染全程都可以有血清的存在，使用更方便。Xfect的價(jià)格為2001元/100次，注意，這里的100次是以6孔板的孔計(jì)算的，如果換算成24孔板，大約則是500次。與**的轉(zhuǎn)染試劑相比，性價(jià)比頗高。(價(jià)格僅供參考)
Xfect mESC轉(zhuǎn)染試劑則是專為小鼠胚胎干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染而設(shè)計(jì)的。胚胎干細(xì)胞的研究持續(xù)升溫，但轉(zhuǎn)染始終是個(gè)令人頭疼的問題。胚胎干細(xì)胞似乎“百毒不侵”，抗拒著外來的DNA。Xfect mESC則是從2300多個(gè)候選者中脫穎而出的佼佼者，在干細(xì)胞轉(zhuǎn)染上有著不俗的表現(xiàn)。經(jīng)過驗(yàn)證，它在小鼠胚胎干細(xì)胞系E14TG2A 和D3中的轉(zhuǎn)染效率均高于市場上暢銷的其他試劑。Xfect mESC的價(jià)格為2375元/100次。
之后，Clontech又為人成體干細(xì)胞研究推出了Xfect? Adult Stem Cell轉(zhuǎn)染試劑。它的配方經(jīng)過修改，能在人間充質(zhì)干細(xì)胞和脂肪來源的干細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)更高的轉(zhuǎn)染效率。據(jù)介紹，它可以67%的效率轉(zhuǎn)染人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSC)，而人脂肪來源干細(xì)胞(hADSC)的轉(zhuǎn)染效率更高達(dá)99%。Xfect Adult Stem Cell價(jià)格基本同上，為2376元/100次。
sirna的轉(zhuǎn)染
有些小RNA的轉(zhuǎn)染試劑初是為質(zhì)粒導(dǎo)入而設(shè)計(jì)的，之后略加修改，便用于小RNA的轉(zhuǎn)染。Xfect siRNA轉(zhuǎn)染試劑卻并不是這樣一款萬能膏藥。它是為siRNA的導(dǎo)入而特別設(shè)計(jì)的，能與雙鏈寡核苷酸(如siRNA)高效結(jié)合。與上面的Xfect系列產(chǎn)品相似，它在實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染的同時(shí)也不會(huì)殺死您寶貴的細(xì)胞。毒性低，是這種納米顆粒的特點(diǎn)。
這款試劑還有個(gè)特點(diǎn)，無需優(yōu)化。專家為你帶來了佳的方案。對于24孔板，您應(yīng)當(dāng)使用30 pmole siRNA和4 μl轉(zhuǎn)染試劑。這也意味著您再也不用去反復(fù)嘗試不同比例的siRNA和轉(zhuǎn)染試劑，省時(shí)省力，還省樣品。轉(zhuǎn)染過程也非常簡單。您所需的都在試劑盒里，不需要OptiMEM，轉(zhuǎn)染過程可在血清存在時(shí)開展。
Xfect siRNA轉(zhuǎn)染試劑的規(guī)格為1000次，這是對12孔板而言。若是24孔板，大約可用2000次，考慮到2678元的價(jià)格，真是價(jià)格實(shí)惠量又足。有些人也許要說，包裝太大了，我可用不完。Clontech也考慮到這一點(diǎn)，非常貼心地將試劑盒分為4×250的包裝。這樣，幾位就可以拼單購買了。若是一個(gè)大實(shí)驗(yàn)室購買，也可每人分一管，不怕太多人使用，導(dǎo)致試劑被污染。
蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染
與傳統(tǒng)的基因表達(dá)相比，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染非?？焖?，因?yàn)樗@過了轉(zhuǎn)錄和翻譯等過程。它還避免了DNA隨機(jī)整合到靶細(xì)胞的基因組中，造成突變的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)然，前提是您手頭上有目的蛋白。
Xfect Protein 轉(zhuǎn)染試劑是一種經(jīng)過修飾的肽段，其特殊的氨基酸組成使它能夠與目標(biāo)蛋白相互作用，而肽段本身可穿透細(xì)胞膜，所以能協(xié)助目標(biāo)蛋白跨越細(xì)胞膜屏障進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。使用方法極為簡單，只要將目的蛋白與 Xfect Protein轉(zhuǎn)染試劑混合30分鐘后，再與細(xì)胞混合 2 小時(shí)后，您就可以測定蛋白質(zhì)活性。
Xfect Protein 轉(zhuǎn)染試劑并非脂質(zhì)體，毒性超低;蛋白轉(zhuǎn)染效率高，就連難搞的干細(xì)胞或血細(xì)胞也能搞定。Xfect Protein目前有兩種規(guī)格，30次和100次，價(jià)格分別為3354元/30次，7178元/100次。
